在飲用水受到工業(yè)污染時(shí)亞硝胺類化合物是常見的物質(zhì)之一。尤其是亞硝基二甲胺，在很多的工業(yè)污染自然水體事件中都有高濃度的亞硝基二甲胺的存在，另外自來水廠和污水處理廠用氯胺類化合物、臭氧在進(jìn)水質(zhì)處理時(shí)的副產(chǎn)物。

  水中亞硝胺類化合物有很多種檢測(cè)方法，今天我們來講一講氣相色譜法的操作流程。氣相色譜法主要是利用二氯甲烷萃取樣品中的亞硝胺類化合物，然后經(jīng)過脫水和濃縮，接著用弗羅里硅土柱或堿性氧化鋁柱凈化后定容。最后經(jīng)過毛細(xì)管柱分離，氫火焰離子化檢測(cè)器測(cè)定其濃度。

檢測(cè)所用試劑

1.二氯甲烷:農(nóng)殘級(jí)。

2.甲醇:農(nóng)殘級(jí)。

3.丙酮:農(nóng)殘級(jí)。

4.戊烷:農(nóng)殘級(jí)。

5.乙醚:農(nóng)殘級(jí)。

6.硫代硫酸鈉：優(yōu)級(jí)純。

7.無水硫酸鈉：優(yōu)級(jí)純。

使用前，應(yīng)在馬弗爐中于450℃灼燒4h，冷卻后裝入磨口玻璃瓶中密封，置于干燥器中保存。

8.氯化鈉：優(yōu)級(jí)純。

使用前，應(yīng)在馬弗爐中于350℃灼燒4h，冷卻后裝入磨口玻璃瓶中密封，置于干燥器中保存。

9.硫酸：1.84g/ml，優(yōu)級(jí)純。

10.硫酸溶液：1+4（v/v）。

用硫酸配制。

11.氫氧化鈉：優(yōu)級(jí)純。

12.氫氧化鈉溶液：2mol/L。

稱取8.0g氫氧化鈉溶于適量水中，待冷卻至室溫后稀釋定容至100ml，混勻。轉(zhuǎn)入塑料試劑瓶中保存。

13.弗羅里硅土：60目-100目。

在馬弗爐中于650℃灼燒5h，冷卻后貯存于具玻璃塞或內(nèi)襯鋁箔螺旋蓋的棕色玻璃容器內(nèi)。使用前，取適量灼燒后的弗羅里硅土，在內(nèi)襯鋁箔螺旋蓋的玻璃容器中于130℃活化16h，加入2ml水，振搖充分混合10min，靜置至少2h后使用。

14.堿性氧化鋁：100目-200目。

稱取l00.0g氧化鋁于500ml具玻璃塞或內(nèi)襯鋁箔螺旋蓋的棕色玻璃容器中，加入2ml水，振搖充分混合10min，靜置至少2h后使用。

15.混合標(biāo)準(zhǔn)貯備液：2000mg/L。

分別稱取0.200g（精確至0.0001g）N-亞硝基二甲胺、N-亞硝基二乙胺、N-亞硝基二正丙胺和N-亞硝基二苯胺，溶于適量二氯甲烷，全量轉(zhuǎn)入10ml容量瓶中，用二氯甲烷定容至標(biāo)線，混勻，于4℃以下冷藏、避光和密封可保存6個(gè)月。亦可直接購買市售有證標(biāo)準(zhǔn)溶液。

16.混合標(biāo)準(zhǔn)使用液：200mg/L。

準(zhǔn)確移取1.00ml混合標(biāo)準(zhǔn)貯備液于10ml容量瓶中，用二氯甲烷定容至標(biāo)線，混勻，于4℃以下冷藏、避光和密封可保存2個(gè)月。

17.玻璃棉：市售經(jīng)過硅烷化處理的玻璃棉。

18.氮?dú)猓杭兌?ge;99.999％。

19.氫氣：純度≥99.99％。

20.助燃?xì)猓簾o油壓縮空氣，經(jīng)5Å分子篩凈化。

檢測(cè)需要的儀器

1.氣相色譜儀：具氫火焰離子化檢測(cè)器（FID），具分流/不分流進(jìn)樣口，柱箱可程序升溫。

2.色譜柱Ⅰ：石英毛細(xì)管色譜柱，柱長 30 m×內(nèi)徑 0.25 mm，膜厚 0.25 µm，固定相為5％二苯基-95％二甲基聚硅氧烷，或其它等效色譜柱。

3.色譜柱Ⅱ：石英毛細(xì)管色譜柱，柱長 30 m×內(nèi)徑 0.25 mm，膜厚 0.25 µm，固定相為35％二苯基-65％二甲基聚硅氧烷，或其它等效色譜柱。

4.濃縮裝置：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（或具有相同功能的濃縮裝置）和氮吹濃縮儀。

5.層析柱Ⅰ：約 400 mm 長×22 mm 內(nèi)徑，用于弗羅里硅土柱凈化法。

6.層析柱Ⅱ：約 300 mm 長×10 mm 內(nèi)徑，用于堿性氧化鋁柱凈化法。

7.分液漏斗：500 ml，具聚四氟乙烯塞。

8.一般實(shí)驗(yàn)室常用儀器和設(shè)備。

水樣采集及貯存要求

  采集時(shí)要用硬質(zhì)磨口玻璃瓶或具聚四氟乙烯材質(zhì)蓋墊的螺紋口玻璃瓶，水樣應(yīng)充滿樣品瓶并加蓋密封，于4℃以下冷藏、避光保存和運(yùn)輸。采樣后應(yīng)在7d內(nèi)對(duì)樣品進(jìn)行萃取，萃取后若不能及時(shí)測(cè)定，應(yīng)于4℃以下冷藏、避光和密封保存，30d內(nèi)完成分析測(cè)定。

水樣的制備

萃取和濃縮

  1.量取250ml樣品于500ml分液漏斗中，用硫酸溶液或氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)樣品的pH值為6-9，加入50ml二氯甲烷，振蕩萃取2min，靜置10min，兩相分層，收集有機(jī)相，重復(fù)萃取2次-3次。合并有機(jī)相于錐形瓶中，加入無水硫酸鈉脫水干燥。

  2.不需凈化的樣品，使用濃縮裝置將萃取液濃縮至1ml（V1），待測(cè)。需要凈化的樣品，使用濃縮裝置將萃取液濃縮至5ml，待凈化。

凈化水樣

  對(duì)于成分復(fù)雜的地表水、工業(yè)廢水和生活污水，萃取后使用弗羅里硅土柱或堿性氧化鋁柱進(jìn)行凈化。

弗羅里硅土柱凈化

  在層析柱Ⅰ底部放入約0.5cm厚的玻璃棉，再放入22.0g已活化的弗羅里硅土，輕敲柱子使其內(nèi)容物向下沉實(shí)，在弗羅里硅土層上端加入約0.5cm厚的無水硫酸鈉。用40ml乙醚/戊烷（15+85，v/v）淋洗柱子，棄去淋洗液，當(dāng)無水硫酸鈉層恰好暴露于空氣之前，加入濃縮后的5ml萃取液。

用90ml乙醚/戊烷（15+85，v/v）進(jìn)行第一次洗脫，然后用100ml丙酮/乙醚（5+95，v/v）進(jìn)行第二次洗脫，收集合并兩次洗脫液。使用濃縮裝置將收集的洗脫液濃縮至1.0ml（V1），待測(cè)。

堿性氧化鋁柱凈化

   在層析柱Ⅱ底部放入約0.5cm厚的玻璃棉，再放入12.0g準(zhǔn)備好的堿性氧化鋁，輕敲柱子使其內(nèi)容物向下沉實(shí)，在堿性氧化鋁層上端加入約1cm厚的無水硫酸鈉。用10ml乙醚/戊烷（3+7，v/v）淋洗柱子，棄去淋洗液，當(dāng)無水硫酸鈉層恰好暴露于空氣之前，加入濃縮后的5ml萃取液。

用10ml乙醚/戊烷（3+7，v/v）進(jìn)行第一次洗脫，然后用60ml乙醚/戊烷（1+1，v/v）進(jìn)行第二次洗脫，收集合并兩次洗脫液。使用濃縮裝置將收集的洗脫液濃縮至1.0ml（V1），待測(cè)。

空白試樣的制備

  量取250ml同批次實(shí)驗(yàn)用水代替樣品，按照與試樣的制備相同步驟，制備空白試樣。

具體檢測(cè)步驟

儀器參考條件

不同型號(hào)氣相色譜儀的最佳工作條件不同，應(yīng)按照儀器說明書進(jìn)行操作。常用的儀器參考條件如下：

進(jìn)樣口溫度：250℃。

進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比為5:1。

柱箱溫度：初始溫度50℃，保持2.5min，以30℃/min的速率升至220℃，保持4min。

柱流量：氮?dú)?.2ml/min。

進(jìn)樣體積：1.0ul。

檢測(cè)器溫度：300℃；燃?xì)猓簹錃饬髁?0ml/min；助燃?xì)猓嚎諝饬髁?00ml/min。

校準(zhǔn)曲線的繪制

  取6個(gè)5ml容量瓶，分別加入適量二氯甲烷，分別加入25.0ul、50.0ul、100.0ul、150.0ul、200.0ul、250.0ul混合標(biāo)準(zhǔn)使用液，用二氯甲烷定容，搖勻，配制成4種亞硝胺類化合物質(zhì)量濃度分別為1.00mg/L、2.00mg/L、4.00mg/L、6.00mg/L、8.00mg/L和10.0mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)系列。按照儀器參考條件，由低濃度到高濃度依次進(jìn)行測(cè)定。以亞硝胺類化合物的質(zhì)量濃度（mg/L）為橫坐標(biāo)，峰面積或峰高為縱坐標(biāo)，繪制校準(zhǔn)曲線。

水樣檢測(cè)

  準(zhǔn)確移取1.00ul制備好的試樣，按照與繪制校準(zhǔn)曲線相同的儀器參考條件和步驟進(jìn)行測(cè)定。其中定量分析用外外標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法，按照應(yīng)公式可以計(jì)算出水樣中目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度。

  此方法來源于《水質(zhì) 亞硝胺類化合物的測(cè)定 氣相色譜法》

  水質(zhì)檢測(cè)